Extração de DNA Genômico de Sangue Humano: Uma Breve Introdução
por Neoteryx
O DNA genômico (gDNA) é encontrado nos cromossomos. Tem um peso molecular mais alto e é mais longo em comparação com o DNA plasmidial. É o gDNA que os cientistas precisam e coletam ao fazer o sequenciamento do genoma.
Um dos propósitos do sequenciamento do genoma é ajudar os cientistas a entenderem como o genoma funciona e como os genes trabalham juntos para permitirem o crescimento, o desenvolvimento e a manutenção de todo o corpo humano ou de qualquer outro organismo. Para que um cientista possa estudar como o genoma funciona, um processo chamado extração de DNA genômico deve ocorrer. Existem várias maneiras de extrair o DNA genômico e de diferentes fontes, incluindo sangue, cabelo, urina, etc.
Como isso é feito?
Existem formas tradicionais e modernas de extrair DNA genômico do sangue. A opção que um cientista decide aplicar depende do tipo de equipamento disponível. Estes incluem extração através de fenol.
A extração através de fenol é o processo pelo qual um volume de fenol é adicionado a uma mistura aquosa com as proteínas e o DNA a ser extraído. Fenol e água não podem se misturar, portanto, eles formam duas fases aquosas distintas uma formada por água e outra por fenol. Estas fases são misturadas completamente “forçando” o fenol na água formando uma emulsão com gotículas por toda parte. As proteínas dentro d’água são desnaturadas e divididas no fenol. O DNA, por outro lado, permanece na água. A solução é centrifugada forçando as fases a se separarem. O DNA contido na fase aquosa é pipetado enquanto a solução de proteína é descartada. O DNA é então concentrado e dessalinizado por precipitação utilizando etanol. Este método é, no entanto, demorado e os reagentes podem ser tóxicos e perigosos para a saúde.
Outros métodos semelhantes e tradicionais de extração incluem precipitação com isopropanol, extração com solvente não orgânico, o método do lisado de formamida e adsorção com partículas de vidro. No entanto, devido à sua ineficácia na extração de DNA genômico de resíduos de sangue seco congelado, os cientistas se aventuraram a encontrar melhores maneiras de realizar a extração.
Os métodos modernos de extração incluem o método de salinização não enzimática e o método de microesferas. Esses métodos são econômicos, menos demorados e produzem uma quantidade melhor de DNA em comparação com os meios tradicionais.
Sangue Capilar ou Sangue Venoso, qual é a diferença?
De modo geral, tanto o sangue Capilar quanto o Venoso podem ser usados para as mesmas aplicações em Sorologia sem afetar a validade dos resultados do teste. Existem algumas pequenas diferenças nos níveis de Hemoglobina e Hematócrito medidos em cada um. Essas diferenças podem variar significativamente dependendo de fatores, como por exemplo, o sexo da pessoa e os níveis de Ferro no sangue.
O sangue Capilar também costuma apresentar níveis de Glicose significativamente mais elevados do que o sangue Venoso coletado da mesma pessoa. No entanto, testes comparando o desempenho de cada tipo de sangue durante a análise de Anticorpos para Sarampo mostraram que ambos os tipos eram igualmente confiáveis para esse propósito. As amostras de sangue Capilar provaram ser muito úteis em estudos de Anticorpos contra Influenza e outros vírus também.
Por que isso é importante?
A extração é valiosa no sequenciamento do genoma e no estudo de distúrbios genéticos. Com as informações obtidas através do DNA, é possível desenvolver um tratamento para um paciente específico, além de auxiliar nas investigações forenses.
Com a revolução da microamostragem na pesquisa molecular, tudo se resume a obter muitas informações de uma pequena quantidade de material.
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