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Kit Extração Clarity OTX

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Kits de Extração Clarity® OTX™

Rápida limpeza de oligo terapêuticos a partir de amostras biológicas

Recuperação de extração típica > 80 %

Não necessita de extração líquido-líquido

Apropriado para a maioria de oligos terapêuticos, tecidos e fluidos

Bioanálise otimizada por LC/MS

 

Recuperação efetiva

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A solução de extração Clarity® OTX foi desenvolvida para isolar efetivamente uma larga faixa de oligonucleotídeos terapêuticos a partir de fluidos e tecidos. Este, utiliza um sorbente de extração de fase sólida que juntamente com tampões cuidadosamente formulados promovem recuperações melhores que 80 %.

 

Excelente linearidade

Esforços foram realizados para desenvolver uma solução de extração que poderia proporcionar uma boa linearidade e resultados quantitativos confiáveis.

 

Preparação da amostra:

Adicionar um volume igual de Tampão de carga Lise para matrizes de fluidos biológicos

Utilize o Vortex brevemente

 

Curva de Linearidade para
tecido de fígado
Protocolo de extração

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  Condições: 
1 mL Metanol (Vácuo ~2” Hg)
  Equilíbrio: 
1 mL Tampão de equilíbrio (Vácuo ~3” Hg)
  Carregar amostra: 
0,4 mL - 3 mL volume (Vácuo ~3” Hg)
  Vácuo: 
10” Hg por ~10 segundos para completa eluição através do cartucho
  Lavagem: 
6 mL Tampão de lavagem (2 mL x 3) (Vácuo 3-4” Hg)
  Vácuo: 
10-15” Hg por ~1 minuto
  Eluição: 
1 mL Tampão de eluição (Vácuo ~3” Hg)
  LC/MS Prep: 

Preparação para LC/MS: Seque ou liofilize e reconstitue em

    100 µL de água ou tampão aquoso
 
Desde baixas até altas concentrações de ng/mL, uma excelente linearidade é alcançada em MS na extração de oligo terapêuticos e dos metábolitos através da metodologia de Clarity OTX. Linearidade do oligonucleotídeo 19mer P-S em 1g de tecido de fígado, baseado na área de pico MS, foi avaliado em 4 diferentes concentrações em tecido de fígado de 100 µg a 10 µg. Vemos uma alta recuperação e boa linearidade através de concentrações fisiológicas relevantes para este estudo inicial.

 

UV Recuperação de dados
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MS Recuperação de dados
18869.png As ilustrações acima mostram a recuperação do 19mer tioato a partir de 200 µL de plasma humano. Os dados do UV, mostram que 90 % da recuperação é alcançada com o protocolo de extração do Clarity OTX. Os dados do MS demonstram que os contaminantes no plasma são efetivamente reduzidos, completamente isolados e recuperados do analíto alvo é alcançada.

 

 

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