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Axia

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Coluna Axia

Cromatografia Líquida Preparativa


 cromatografialiquidapreparativa

 

Aumente o desempenho das colunas de HPLC preparativas com o novo hardware e técnicas de empacotamento usando um pistão de compressão hidráulica. Tecnologia premiada, vencedora do prêmio R&D 100.

 

Fontes de falha da coluna
A maior razão de falhas das colunas para Cromatografia é a formação de volume morto devido:

✓ Ao processo de empacotamento

   - Baixa densidade da sílica ou sílica não uniforme

   - Compressão da sílica com canais ou variações

✓ Ao uso operacional

   - Fluxo excessivamente alto

   - Amostra de alta viscosidade

 

Dicas para melhorar o tempo de vida útil:
1 Use o processo de empacotamento das colunas preparativas Axia. O pistão de compressão hidráulica resolve a formatação de vazio como fonte de falha de coluna;
2 Use um sistema de SecurityGuard PREP e/ou filtro de linha para capturar os contaminantes da fase móvel;
3 Filtre ou centrifugue as amostras antes da injeção;
4 Aumente o tempo de gradiente a 100% orgânico (para mehorar a limpeza da coluna);
5 Diminua o DMSO como solvente de injeção de 100% para 50% com 50% de metanol (ajuda a diminuir a precipitação da amostra quando entra em contato com a fase móvel);

 

Pistão de compressão hidráulica
Processo de empacotamento AXIA

Melhora o tempo de vida útil da coluna

Reprodutibilidade: Coluna a Coluna

Melhor eficiência

Melhor formato de pico

Aumento da capacidade de carga

Estabilidade com alto fluxo

 

Cálculo do seu fator de escala:
Para transferir uma separação para uma escala preparativa é necessário redefinir as condições cromatográficas como o fluxo, o diâmetro interno da coluna e a quantidade de amostra.

Quando apenas o diâmetro interno da coluna está mudando:

FE= (d2/d1)2

Quando ambos, diâmetro interno e comprimento estão mudando:

FE= (d2/d1)2* (L2/L1)
Onde Onde
FE: Fator de escala FE: Fator de escala
d1= diâmetro interno da coluna original L1= comprimento da coluna original
d2= diâmetro interno da coluna para qual você vai transferir L2= comprimento da coluna para qual você vai transferir

 

Como determinar os novos fluxos e quantidade de amostra:
1 Ajustando o método para adaptar as variações de quantiade de amostra ou de tamanho de coluna requer mudar múltiplos parâmetros, incluindo o fluxo e o diâmetro interno de coluna.
2 Com a sílica de alta área de superfície da Phenomenex, é possível uma maior carga de amostra e uma boa resolução.

 

Estimativa da quantidade de amostra (mg) e do fluxo (mL/min) de uma coluna de 4,6mm de DI para uma coluna Preparativa
AXIA (21,2 - 50 mm de DI) Diâmetro interno (mm)
Comprimento (mm) 4.6 mm 21.2 mm 30 mm 50 mm
50 0.5-2 10-45 20-90 60-270
75 0.75-3 15-70 30-140 90-420
100 2-6 20-105 40-210 120-630
150 3-6 30-60 60-320 180-960
250 2.5-10 50-240 100-480 300-1400
Fluxo (típico até alto) (mL/min) 1-1.5 20-40 40-80 120-270

 

Fatores que influenciam a transferência para escala preparativa

 

Para a cromatografia preparativa, a seletividade e a capacidade de carga são propriedades críticas.

1 Seletividade - A resolução suficiente deve ser obtida primeiro na escala analítica antes de maximizar a quantidade de amostra injetada. A seletividade é o parâmetro mais importante dentro da equação de resolução e pode ser prontamente influenciada para a escolha da fase estacionária e do pH da fase móvel.

Escolha a fase estacionária:

Manipulação do pH

Para compostos básicos, considerar carregar com pH alto para aumentar a quantidade de amostra.

Manipular com pH confiável de 1 a 12 com o material Axia Gemini®.

2 Capacidade de carga - A área de superfície, função do tamanho do poro, é uma característica importante da qualidade da sílica usada em aplicações preparativas. Uma alta área de superfície por unidade de volume de coluna é a característica desejada para cromatografia preparativa.

 

Coluna Tamanho do poro (Å) Área de superfície (m2/g)
Synergi™ 80 475
Luna® 100 400
Gemini® 110 375
Jupiter® 300 170

 

 

Vantagens do formato AXIA para transferir diretamente para escala preparativa
Escala direta de 4,6mm para diâmetro interno de 21,2mm, 30mm ou 50mm Aumenta a produção sem comprometer a pureza
- sem diminuição de resolução - quantidade de amostra de 20 até 118 vezes maior

 

 

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