Rosuvastatina demonstra-se estável por 10 dias em Dispositivos VAMS®:
por James Rudge, PhD, Diretor Técnico, Neoteryx | 5 minutos de leitura
Níveis elevados de colesterol e seus impactos na saúde
Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS), estima-se que níveis elevados de colesterol causem 2,6 milhões de mortes anualmente. A OMS informou que em 2008 a prevalência de colesterol elevado globalmente foi de quase 40%. O colesterol elevado pode ser causado por estilo de vida, fatores genéticos, ou ambos. A genética como causa subjacente pode levar a uma condição conhecida como hipercolesterolemia familiar (HF). A HF ocorre como resultado de mutações genéticas no gene do receptor de lipoproteína de baixa densidade (LDL).
É sabido que pacientes não tratados com hipercolesterolemia familiar apresentam risco aumentado de morte cardiovascular prematura. De fato, um estudo da Noruega publicado pelo Journal of American Heart Association em 2014 relatou que mais de 10 milhões de pessoas em todo o mundo têm HF e há cerca de 200.000 mortes causadas por doenças cardiovasculares a cada ano como resultado da HF.
Reduzindo os níveis de colesterol com estatinas
Em 1976, o bioquímico japonês Akita Endo na Empresa Sankyo isolou um composto do fungo Penicillium citrinum, que se descobriu ser um inibidor competitivo da 3-hidroxi-3-metil-glutaril-coenzima A redutase (HMG-CoA redutase) e demonstrou reduzir os níveis de colesterol. Nos anos seguintes, vários grupos trabalharam ativamente em medicamentos com base nessa meta. Um desses medicamentos foi a lovastatina Em setembro de 1987, a lovastatina (da Farmacêutica Merck) tornou-se a primeira estatina a ser aprovada pela Food and Drug Administration (FDA) dos EUA. Esta foi seguida pelas seguintes: pravastatina (1991), fluvastatina (1994), atorvastatina (1997), cerivastatina (1998) e rosuvastatina em (2003).
As estatinas funcionam inibindo a HMG-CoA redutase, que é uma enzima importante na biossíntese da lipoproteína de baixa densidade (LDL), uma proteína que transporta o colesterol no sangue. O colesterol é uma molécula chave na biologia que se encontra nas membranas celulares e é a molécula principal de vários hormônios (como testosterona e cortisol). No entanto, o colesterol sérico elevado leva ao espessamento das paredes das artérias, aumentando o risco de acidente vascular cerebral e ataque cardíaco.
Em sua abordagem de estudo, Min-Gul Kim et al destacaram que o foco no paciente está se tornando cada vez mais importante devido a problemas de adesão, recrutamento e uma necessidade não atendida de simplificar o processo de amostragem de sangue e reduzir a dor. O grupo optou por usar dispositivos Mitra® baseados na Tecnologia VAMS®. A natureza volumétrica do dispositivo supera o problema do efeito volumétrico associado ao hematócrito que são observados com alguns outros métodos de amostragem de sangue. Esses dispositivos volumétricos são fáceis de usar e permitem que as pessoas coletem suas amostras em casa usando um método simples de punção digital Os pesquisadores comentaram ainda que os dispositivos Mitra e o método de punção digital seriam ideais para amostrar populações pediátricas, bem como pessoas com anemia grave.
Método de Estudo e Resultados para Rosuvastatina
- O método analítico foi desenvolvido com sucesso em um HPLC Agilent e AB Sciex 4000 QTRAP. O tempo de retenção foi de apenas 1 minuto para eluição do fármaco.
- A maioria dos analitos passou em precisão e exatidão, exceto para drostanolona (23,1% DPR no nível baixo) e DHCMT (2,25% DPR no nível alto) com a precisão sendo medida ao longo do dia.
- Isso foi medido em níveis de Controle de Qualidade (CQ) baixo, médio e alto de sangue humano fortificado com medicamento.
- Além disso, as pontas foram agitadas em vórtex por 10 minutos ou vortexeadas e sonicadas por 10 minutos cada.
- As recuperações de extração foram observadas em 102,75-117,33% para todos os três níveis quando o metanol foi empregado com vortex e sonicação; a precisão estava dentro de 10%.
- A etapa de sonicação melhorou significativamente as recuperações de extração em comparação com apenas o vórtex sozinho (70,62-91,83).
- Quando a acetonitrila foi empregada, foi observada recuperação de extração inferior a 5% com Coeficientes de Variação superiores a 15%.A otimização da extração foi conduzida da seguinte forma:
Discussão e Conclusões dos Autores do Estudo
- Para validação: especificidade, transporte, linearidade e reprodutibilidade (dentro e entre corridas) foram asseguradas e os resultados para o método otimizado ficaram bem dentro de ±15%.
- Em termos de estabilidade, VAMS® com CQ baixo e alto foram avaliados em triplicata. As seguintes condições foram investigadas:
- Método laboratorial de bancada em temperatura ambiente por cinco horas.
- Estabilidade de descongelamento e congelamento em três ciclos.
- 30 dias em temperatura ambiente, em comparação com tempos de secagem de 1 hora.
- A rosuvastatina normalmente requer um estabilizador de pH básico adicionado a uma amostra de sangue para auxiliar na estabilidade; estabilidade em VAMS seco foi então testada ao longo de 10 dias – com e sem a presença do estabilizador.
- Todas as condições de teste acima não afetaram a estabilidade das amostras.
Comentários da Neoteryx
O estudo resumido aqui mostrou que o grupo de pesquisa demonstrou com elegância a importância das condições de extração para obter recuperações de extração quantitativas. O interessante é que isso foi alcançado usando apenas metanol (sem modificador de pH adicionado). Deve-se notar que, para alguns analitos, o metanol nem sempre é adequado e outras condições devem ser exploradas, incluindo extrações aquosas e limpeza pós-extração.
Um estudo adjunto interessante teria sido realizar um experimento do efeito volumétrico associado ao hematócrito. No entanto, sabemos de estudos anteriores que altas recuperações de extração com 45% de hematócrito geralmente produzem resultados de viés de extração aceitáveis, mas não podem ser garantidos. Portanto, a realização de um experimento de hematócrito é um teste útil, especialmente se se espera que a população-alvo tenha uma ampla faixa de hematócrito.
Outra observação interessante foi que a secagem da amostra impediu a atividade de uma carboxilesterase, negando a necessidade de pré-tratar a amostra (ou os microamostradores) com um modificador de pH. Isso simplificaria o transporte e o armazenamento da coleta de amostras, permitindo a coleta remota para projetos de ensaios clínicos remotos ou híbridos em ensaios clínicos envolvendo rosuvastatina.
Este artigo foi resumido para nossos leitores por James Rudge, PhD, Diretor Técnico da Neoteryx. Este é um conteúdo com curadoria. Para saber mais sobre a importante pesquisa descrita neste blog, visite o artigo original em Translacional e Farmacologia Clínica. Créditos de imagem: iStock, Neoteryx, Trajan Scientific and Medical