Usando a Tecnologia VAMS® na Batalha Contra o COVID-19
Quando a pandemia do COVID-19 chegou no início de 2020, as pessoas precisavam se abrigar e isolar, países inteiros foram bloqueados e o movimento de indivíduos foi reduzido ao mínimo absoluto. Para muitos, houve uma pausa temporária durante o verão, quando as infecções caíram significativamente e a vida parecia estar voltando ao “quase normal”. No entanto, à medida que as temperaturas mais frias voltaram ao hemisfério norte, as infecções em muitos países começaram a aumentar acentuadamente. Ao longo desta pandemia, houve grande demanda por opções de amostragem para permitir que as organizações monitorassem remotamente populações para a infecção por COVID -19 e também para monitorar pacientes com doenças crônicas que devem ficar seguros em suas casas. Além disso, a amostragem remota e as comunicações de telessaúde ajudaram prestadores da saúde e pesquisadores a alcançarem pacientes e voluntários vulneráveis para ensaios clínicos.
O microamostrador Mitra® baseado na tecnologia VAMS® atende às necessidades de coletas remotas e está sendo usado em todo o mundo, (uma vez que a demanda para coleta remota de sangue centrada no paciente disparou). Uma área em que a demanda por Mitra® e Tecnologia de Microamostragem Volumétrica Absorvente – VAMS® (Volumetric Absorptive Microsampling) tem sido particularmente alta é a de testes sorológicos e relacionados para ajudar na pesquisa de SARS-CoV-2. Esta minirrevisão da literatura sobre COVID-19 concentra-se no uso de VAMS® em ensaios sorológicos e relacionados à pandemia de coronavírus.
O NIH anuncia uma grande pesquisa sorológica usando Mitra® e VAMS®
Em abril de 2020, os Institutos Nacionais de Saúde ( NIH ) anunciaram que realizariam um estudo sorológico de pelo menos 10.000 voluntários [1]. Os pesquisadores do NIH queriam fornecer aos voluntários uma opção remota para coletar suas próprias amostras de sangue em casa para enviar ao laboratório do NIH. Eles decidiram usar os Kits de Coleta de Sangue Mitra® da Neoteryx® para esta finalidade. Os pesquisadores relataram que os dispositivos Mitra® foram um meio comprovado para coletar e transportar facilmente amostras quantitativamente precisas de sangue para estudos semelhantes. Em maio de 2020, a equipe de pesquisa compartilhou suas descobertas iniciais, relatando que havia desenvolvido um teste ELISA robusto para testar anticorpos IgA, M e G para proteínas spike e RBD do soro. Além disso, eles também demonstraram uma excelente correlação de extratos de amostras de sangue de Mitra® para IgG e IgM tanto para a proteína Spike quanto para o domínio de ligação ao receptor. Em um artigo publicado na Nature Communications (janeiro de 2021, [2]), eles afirmaram:
“Houve uma forte correlação linear entre os resultados do soro e do microamostrador [Mitra®] (pico = 0,991, RBD = 0,961), demonstrando que nosso método funcionou bem com os dois tipos de amostra. Isso sugere que não apenas a detecção de anticorpos pode ser realizada de forma confiável, mas a quantificação de anticorpos a partir de dispositivos de amostragem enviados por correio foi possível.”
Resumo do método de extração NIH Mitra®:
- Ponta do Mitra® (20 µL) adicionada a PBS 1x (400 ul), BSA (1%) e Tween 20 (0,5%) em uma placa de poço profundo de 1 mL;
- A placa foi selada com folha adesiva e incubada a 4 °C durante a noite;
- O eluato foi armazenado a – 80 °C ou analisado por ELISA usando detecção de HRP (detalhes completos podem ser obtidos no manuscrito original [2]).
Ensaio Multiplex Usando Mitra para Medir Simultaneamente > 30 Cepas de Gripe
Os pesquisadores do NIH aprenderam sobre a utilidade dos dispositivos Mitra® e da tecnologia VAMS® para estudos de sorologia de outra instituição de pesquisa muito respeitada. Um ano antes do estudo COVID-19 no NIH, um grupo de pesquisa do Instituto de Ciências Clínicas e Translacionais da Universidade de Rochester ( UR- CTSI ), liderado pelo Dr. Martin Zand, realizou um pequeno estudo sorológico em uma coorte de 20 voluntários para examinar soroprevalência de 30 cepas de influenza. Este estudo piloto teve como objetivo determinar se era possível combinar a coleta domiciliar de amostras VAMS® com o ensaio FluPlex que o laboratório do Dr. Zand havia desenvolvido. Este estudo comparativo mostrou boa estabilidade da amostra onde as amostras de sangue seco de Mitra® foram armazenadas 21 dias em condições ambientais no laboratório. As amostras permaneceram estáveis mesmo depois de enviadas ao laboratório no auge do verão, quando as temperaturas subiram. Valores sanguíneos corrigidos para níveis séricos (usando um algoritmo) com alta concordância (R2 0,9721). Além disso, amostras de Mitra® coletadas por um profissional de saúde no dia 1 correlacionaram-se com concordância igualmente alta (R2 0,976) [3]. Eles afirmaram em seu relatório que:
“Finalmente, também gostaríamos de observar que essa abordagem não é específica do patógeno, mas pode ser adaptada para estimar a imunidade mediada por anticorpos após a vacinação para quaisquer outros patógenos virais, onde os principais alvos de anticorpos são conhecidos e populações amplas precisam ser pesquisadas. Além disso, outros dados biológicos podem ser facilmente obtidos a partir de um segundo dispositivo VAMS® (outros 10 μL de sangue), incluindo amostras de DNA para sequenciamento genômico do hospedeiro ou patógenos transmitidos pelo sangue. É provável que esses métodos sejam cada vez mais usados em ensaios clínicos em áreas remotas e rurais, bem como em ensaios clínicos mais recentes em qualquer lugar’”.
Foram essas palavras quase proféticas do Dr. Zand no estudo de seu grupo e observações semelhantes, que deram aos pesquisadores do NIH a confiança para executar seu grande estudo sorológico de COVID-19 em 2020 usando dispositivos de coleta remota Mitra® com tecnologia VAMS®.
Resumo do método de extração do ensaio FluPlex:
- Pontas (10 µL) embebidas em 200 µL de tampão de extração (PBS+1% BSA +0,25 Tween) em placas de 1 mL de 96 poços, agitadas durante a noite;
- Amostra diluída adicionalmente 1:250 para dar uma diluição final de 1:5000;
- O diluente (200 µL) foi então adicionado a uma placa de 96 poços de fundo transparente. Para a extração do imunoensaio (MAGPIX Multiplex Reader);
- Uma mistura de pérolas (50 µL, contendo 30 HAs recombinantes separados foi adicionada a cada poço da placa);
- As placas foram então incubadas com agitação suave durante 2h à temperatura ambiente e depois lavadas 3x com (PBS + 1% Bris + 0,1% BSA) usando um ímã para imobilizar as esferas;
- Adicionou-se Ab secundário IgG-PE e as placas foram incubadas por mais 2h;
- Foram realizadas mais três lavagens e, em seguida, as esferas foram ressuspensas em fluido de acionamento (Luminex Co., TX).
Massachusetts General publica ensaio sorológico Roche a partir de amostras remotas de Mitra®
Os artigos do NIH e da Universidade de Rochester demonstraram que era possível desenvolver com sucesso ensaios de sorologia a partir de dispositivos Mitra® e ambos os grupos usaram ensaios “caseiros”. A equipe do NIH projetou seu ensaio para que qualquer pessoa com equipamento de laboratório padrão pudesse adotar seu ensaio para a realização de ELISA. O ensaio FluPLex requer o uso de equipamentos de alta sensibilidade que nem todos os laboratórios de sorologia possuem, mas tem a vantagem de ser um ensaio multiplex. Em novembro de 2020, pesquisadores do Massachusetts General Hospital and Partners Healthcare Group publicaram um trabalho sobre a adaptação de um ensaio de Autorização de Uso de Emergência (EUA) aprovado pela FDA no Roche Cobas ® 8000 e801 Immunoassay Analyzer. Eles foram os primeiros a demonstrar tal ensaio em um grande analisador de sorologia de extratos com Mitra®. O ensaio foi validado para medir anticorpos IgG, IgM e/ou IgA produzidos a partir da proteína nucleocapsídica do vírus SARS-CoV-2 [4]. O grupo validou o ensaio incluindo uma comparação dos resultados de duas instalações diferentes com alta concordância (R2 0,97). Ao comparar uma coorte de soro pareado (por punção venosa) e extratos secos (coleta capilar em campo), ambos apresentaram soroprevalência de 24% (soro 98/402) e 97/402 para amostras secas. Isso se traduziu em uma concordância de 99% (397/402). A equipe concluiu o seguinte:
“Extratos de sangue seco de dispositivos Neoteryx® Mitra® adquiridos em um estudo de soroprevalência na comunidade mostraram sensibilidade e especificidade quase idênticas na detecção de anticorpos SARS-CoV-2 em comparação com soros puros usando limites predefinidos para cada tipo de amostra. No geral, este estudo afirma o uso do dispositivo de coleta de sangue seco Neoteryx® Mitra® com o ensaio de anticorpos totais Roche Elecsys® SARS-CoV-2 para testes remotos ou em casa, bem como estudos de soroprevalência em larga escala na comunidade.”
Resumo da Metodologia de Extração para o Método Roche Adaptado:
- Amostrador Mitra de 20 µL, amostrado e seco por pelo menos 24h;
- Extraído em Autoracks com 200 μL/poço de tampão de extração (1% BSA, 50 mM Tris (pH 8,0), 140 mM NaCl e 0,05% Tween-20);
- Foi relatado que BSA foi usado para estabilizar anticorpos e a adição de Tween 20 foi usada para facilitar a extração e inativar o vírus;
- A placa foi agitada por 2h a 600 RPM;
- O ensaio foi executado em um Roche Cobas® 8000 e801 Immunoassay Analyzer, que também mediu os índices de hemólise e lipemia.
Uma pequena desvantagem do ensaio Roche foi que ele foi desenvolvido para detectar anticorpos produzidos contra a proteína nucleocapsídeo. Este foi um ensaio altamente sensível, mostrando uma grande especificidade para soropositividade para aqueles que desenvolveram COVID-19. No entanto, os autores comentaram que este ensaio não seria capaz de detectar imunidade a anticorpos criados a partir do domínio de ligação ao receptor (RBD), que são ambos alvos para o desenvolvimento e implantação de vacinas. Eles comentaram que se tal ensaio fosse desenvolvido em spike e/ou RBD, haveria a opção de diferenciar entre convalescença/imunidade natural e imunidade aumentada pela vacinação.
Análise abrangente da dinâmica do anticorpo SARS-CoV-2 na Nova Zelândia
Em dezembro de 2020, uma equipe de pesquisa da Universidade de Auckland relatou uma investigação sobre a imunidade longitudinal ao SARS-CoV-2 medindo não apenas perfis de anticorpos elevados, mas também quais deles eram neutralizantes. Usando a mesma plataforma analítica de Rochester (Luminex MagiPlex), a equipe de Auckland conseguiu desenvolver ensaios multiplex para examinar anticorpos Spike, RBD e Nucleocapsid (NC) das classes, IgM, IgA, IgG, bem como subclasses de IgG 1, 2, 3 e 4 durante um período de 250 dias [5]. Eles foram capazes de demonstrar que, sem imprevistos, anticorpos neutralizantes foram criados contra Spike e RBD, mas não contra NC. Além disso, a IgG mostrou a maior longevidade protetora, o que levou a equipe a concluir que esses anticorpos estão presentes por 4-8 meses após a infecção. Em termos de classes de anticorpos IgG, IgG1 e IgG3 foram mais prevalentes e duraram mais do que IgG2 e IgG4, o que se alinha com o que se sabe sobre infecção viral em comparação com desafios imunológicos [6].
Embora a maior parte do trabalho realizado pela equipe de Auckland tenha sido a partir de amostras de soro, eles também validaram o ensaio em dispositivos Mitra® para medição de IgG total. Nesta parte do estudo, extratos de Mitra® retirados de sangue total (n=19) foram comparados com extratos séricos pareados. Como o ensaio do NIH, os pesquisadores assumiram um ajuste de 50% para levar em conta o HCT. Novamente, correlações muito altas foram observadas para NC (R2 = 0,9957), RBD (R2 = 0,9929) e Spike (R2 = 0,9918). Isso levou os pesquisadores a concluir:
“A forte correlação entre IgG anti-RBD e NAbs, combinada com a demonstração neste estudo e por outros de que o anti-RBD pode ser medido de forma confiável a partir de amostras de sangue seco por picada de dedo, fornece viabilidade para futuros estudos imunocinéticos de SARS-CoV-2 que incorporar ensaios baseados em RBD-IgG. A importância de realizar esses estudos em escala durante o lançamento da vacina é particularmente relevante em ambientes como a Nova Zelândia, onde há potencial para obter novas informações sobre as respostas às vacinas, devido à falta de SARS-CoV-2 circulante na comunidade”.
Resumo do Método de Extração do Mitra®:
- Pontas de 20 µL foram extraídas em 400 µL de PBS + 1% de BSA + 0,05% de Tween 20 agitado durante a noite a 300 rpm 4°C;
- Diluição equivalente de soro de eluentes calculada a 1:40;
- Os extratos foram então analisados pelo sistema MagiPlex.
Usando Mitra® para Imunoensaio de Fluxo Lateral e Arrays Baseados em Chip
A maioria dos testes de sorologia é realizada usando imunoensaio. Ou ELISA é empregado ou um instrumento de imunoensaio, como o Luminex ou Roche Cobas, conforme discutido nos exemplos acima. No entanto, outra opção é levar o laboratório para casa e realizar um teste de fluxo lateral que funciona como um teste de gravidez. Embora se possa argumentar que tais testes carecem da quantificação de outros tipos de imunoensaios, eles têm o benefício da portabilidade. De fato, tal teste foi relatado onde as pontas do dispositivo Mitra e papel filtro (DBS) foram comparados ao ELISA. Surpreendentemente, os resultados de IgG foram muito comparáveis, embora os IgM não fossem tão congruentes [7].
Resumo da Metodologia de Extração para o Teste de Fluxo Lateral:
1. A ponta VAMS® foi removida dos corpos do amostrador Mitra® para extração;
2. As amostras secas foram sonicadas por 10 min 1 em 100 µL de EDTA;
3. Após um spin-down de 1 min a 625 × g, 25 L do extrato foram submetidos à análise de fluxo lateral RayBiotech.
Matriz baseada em Chip
Pesquisas promissoras também foram publicadas sobre o desenvolvimento de um imunoensaio nanoarray que pode executar 1.024 amostras por dispositivo com especificidade de 100% e sensibilidade de 98%, com base na análise de 289 amostras de soro humano [8]. As condições de extração foram PBS (1% BSA) ou PBS (1% BSA, 0,5% Tween-20) durante a incubação a 4°C e os autores descobriram que a adição de 0,5% de Tween-20 melhorou muito o ensaio, que também foi usado em outras metodologias de extração de ensaios SARS-CoV-2 no Mitra®. Mitra® e outros dispositivos testados foram armazenados por 1 dia a 55°C. Para o Mitra®, isso resultou em muito pouca degradação da amostra após 6 dias de armazenamento em temperatura ambiente. Uma ligeira degradação da amostra foi observada quando armazenada a 55°C por mais um dia.
Usando Mitra para testes diretos de antígeno
Atualmente, existem dois métodos populares para testes de SARS-CoV-2. O primeiro é o teste viral direto usando PCR (observando os níveis de RNA viral) e o outro é medir a imunidade após uma infecção por COVID-19. Atualmente, a PCR requer um swab nasal e/ou de garganta, o que é extremamente desconfortável. A desvantagem do teste de PCR é que ele não indica infecções anteriores ou se um indivíduo foi infectado recentemente pelo vírus. A desvantagem do teste de anticorpos é que leva até duas semanas após uma infecção viral para que os anticorpos sejam gerados. Além disso, o teste de anticorpos não indica se um indivíduo ainda está infectado. No entanto, a presença de IgM e IgA e o aumento de anticorpos IgG no sangue podem dar ao médico informações sobre se o paciente ainda está infectado. A Quanterix, uma empresa de ciências da vida com sede em Massachusetts, nos Estados Unidos, desenvolveu um método de alta sensibilidade para medir diretamente o antígeno viral (nucleocapsídeo) do sangue [9]. A conquista notável de Quanterix é que isso pode ser alcançado a partir de extratos de Mitra, onde plasma e extratos de Mitra são altamente correlativos (R2 = 0,9924). Os resultados preliminares parecem sugerir que o ensaio é pelo menos tão sensível quanto o teste de PCR, demonstrando que os testes de anticorpos e antígenos podem ser realizados a partir de um cartucho Mitra usando a mesma plataforma. Seu artigo relata o seguinte:
“Demonstramos a detecção em sangue capilar usando o dispositivo de coleta de sangue seco Neoteryx® Mitra®, que permite a coleta de amostras em casa e no local de atendimento. Usando amostras coletadas com Mitra®, monitoramos com sucesso o status da doença de funcionários e residentes na presença de infecções ativas por COVID-19 com sensibilidade clínica comparável aos testes moleculares em nossos experimentos preliminares. Concentrações mais altas de proteína N associadas ao aumento da gravidade e mortalidade da doença e vice-versa, eliminação do antígeno associada a maior capacidade de recuperação.”
Resumo da Metodologia de Extração para Teste de Anticorpo e Antígeno Direto:
- As pontas foram usadas para absorver 20 μL de sangue total e então deixadas secar para por pelo menos 16 horas em uma bolsa com dessecante;
- As pontas foram extraídas em 250 μl de diluente de ensaio com agitação a 400 rpm durante a noite a 2 – 8 ℃, resultando em uma diluição da amostra de 12,5 vezes.
A Quanterix também validou um teste de anticorpos na mesma plataforma Simoa®
Além do inovador teste de antígeno direto, a Quanterix também desenvolveu um teste de anticorpos para medir os níveis de IgG elevados para a proteína spike. Em uma nota de aplicação publicada em 2020, eles conseguiram demonstrar uma correlação impressionante entre sangue seco do dispositivos Mitra® com VAMS® em comparação com plasma úmido (R2 = 0,9996) [10]. Além disso, quando corrigiram o HCT medindo a hemoglobina como biomarcador predicado do HCT, uma abordagem usada pelo grupo Rochester [3], a correlação mesmo com a correção do HCT foi igualmente impressionante (R2 = 0,9987). O grupo também realizou um extenso estudo de estabilidade e demonstrou que, mesmo ao armazenar as amostras VAMS® a 37 °C, observaram uma diminuição de menos de 20% da atividade IgG da proteína SARS-CoV-2 em uma semana. Isso levou o grupo a concluir:
“Isso sugere que as amostras de sangue seco da ponta VAMS Neoteryx são estáveis sob condições ambientais extremas (37°C) durante o transporte por até 1 semana.”
O trabalho realizado pela Quanterix demonstra que o teste de antígeno e anticorpo SAR-CoV-2 é possível a partir do mesmo sistema analítico (embora dois ensaios separados). Eles também mostraram que ambos os ensaios são compatíveis com a amostragem domiciliar do Mitra. Um pensamento intrigante é que os testes de antígeno e anticorpo podem ser realizados a partir de uma gota de sangue coletada em dois amostradores Mitra em um cartucho enviado para a mesma instalação para teste. Com a incrível sensibilidade da plataforma Simoa e sua capacidade multiplex, a detecção de antígeno e um perfil completo de anticorpos (incluindo talvez a medição de anticorpos neutralizantes) poderiam, em teoria, ser desenvolvidos.
O uso do Mitra em ambientes de alto rendimento para testes em massa de COVID-19
Um dos benefícios de usar os dispositivos Mitra (amostradores) como veículos para facilitar a coleta domiciliar de sangue e o transporte para os laboratórios é que os amostradores são projetados para trabalhar em ambientes de baixo e alto rendimento. De fato, o NIH está usando os amostradores para sua pesquisa sorológica de grande coorte (n=> 10.000) e desenvolveu uma plataforma ELISA semiautomatizada para apoiar o estudo [2]. Outro exemplo é da LGC no Reino Unido. O grupo de pesquisa do Centro de Excelência em Imunogenicidade da LGC, com sede em Cambridge, desenvolveu um serviço de teste de sorologia para SARS-CoV-2 com capacidade de processar mais de 40.000 amostras de Mitra por dia em seu laboratório de alto rendimento. O ensaio possui a Marca CE e eles solicitaram o credenciamento ISO17025 [11].
O uso do Mitra® em ambientes de alto rendimento para testes em massa de COVID-19
Um dos benefícios de usar os dispositivos Mitra® (amostradores) como veículos para facilitar a coleta domiciliar de sangue e o transporte para os laboratórios é que os amostradores são projetados para trabalhar em ambientes de baixo e alto rendimento. De fato, o NIH está usando os amostradores para sua pesquisa sorológica de grande coorte (n=> 10.000) e desenvolveu uma plataforma ELISA semiautomatizada para apoiar o estudo [2]. Outro exemplo é da LGC no Reino Unido. O grupo de pesquisa do Centro de Excelência em Imunogenicidade da LGC, com sede em Cambridge, desenvolveu um serviço de teste de sorologia para SARS-CoV-2 com capacidade de processar mais de 40.000 amostras de Mitra por dia em seu laboratório de alto rendimento. O ensaio possui a Marca CE e eles solicitaram o credenciamento ISO17025 [11].
Usando Mitra em ensaios clínicos para combater o COVID-19
Um dos grandes benefícios dos testes remotos usando dispositivos Mitra® para microamostragem é que os níveis de drogas podem ser monitorados sem a necessidade de os pacientes visitarem clínicas. Essa vantagem foi demonstrada no campo do transplante de órgãos, onde os dispositivos Mitra® foram implantados em pacientes pediátricos transplantados para monitorar remotamente, em casa, seus níveis de drogas e biomarcadores [12,13]. Essa abordagem de monitoramento remoto de pacientes reduz o risco de pacientes transplantados pegarem COVID-19 em hospitais, o que é extremamente importante, pois foi relatado que a mortalidade de pacientes transplantados renais que contraem essa doença é alta [14]. O Mitra® também tem sido usado extensivamente em ensaios clínicos por empresas como Eli Lilly, Astra Zeneca e UCB Pharma, que discutiram o uso do Mitra® e testes remotos em ensaios clínicos [15,16,17,18]. De fato, o Mitra® foi usado recentemente em um ensaio clínico para testar a eficácia do medicamento antimalárico Hidroxicloroquina (HCQ) para determinar se era eficaz como profilático contra o COVID-19. Como parte do estudo, foram feitas medições de sangue de profissionais de saúde usando dispositivos Mitra® para coleta remota de sangue [19]. Embora o teste tenha mostrado que o HCQ não apresentou efeito protetor, ele demonstrou a facilidade e usabilidade do dispositivo em tais testes.
Conclusão: Um Ano de Duras Lições e Insights Úteis
2020 foi um ano que transformou as sociedades e colocou em foco a fragilidade dos seres humanos aos surtos virais. À medida que o vírus SARS-CoV-2 continua a se propagar globalmente, as comunidades de ciências médicas e clínicas responderam a essa emergência de saúde com uma velocidade sem precedentes no desenvolvimento de ensaios, tratamento médico, desenvolvimento e implantação de vacinas. O Microamostrador Mitra® desenvolvido com VAMS® provou ser uma ferramenta útil para se ter na caixa de ferramentas para combater esta doença. Em 2020, aprendemos que o teste remoto não é apenas uma tecnologia ‘boa de se ter’, mas também necessária para fornecer amostras clínicas em tempos de crise. Também aprendemos que os dispositivos Mitra® com tecnologia VAMS® fornecem uma plataforma que pode ser usada em uma sociedade global pós-COVID-19, permitindo-nos praticar pesquisa e medicina sem barreiras.
O Microamostrador Mitra desenvolvido com VAMS provou ser uma ferramenta útil para se ter na caixa de ferramentas para combater esta doença. Em 2020, aprendemos que o teste remoto não é apenas uma tecnologia ‘boa de se ter’, mas também necessária para fornecer amostras clínicas em tempos de crise. Também aprendemos que os dispositivos Mitra com tecnologia VAMS fornecem uma plataforma que pode ser usada em uma sociedade global pós-COVID-19, permitindo-nos praticar pesquisa e medicina sem barreiras.
Referências
- NIH inicia estudo para quantificar casos não detectados de infecção por coronavírus
https://www.niaid.nih.gov/news-events/nih-begins-study-quantify-undetected-cases-coronavirus-infection (Último acesso em 07 de janeiro de 2021) - Padronização de protocolos ELISA para sorologias da pandemia de SARS-CoV-2 usando coleta de sangue clínica e domiciliar. https://www.nature.com/articles/s41467-020-20383-x (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Aplicação de microamostragem absortiva volumétrica (VAMS) para medir anticorpos IgG anti-influenza multidimensionais pelo ensaio mPlex-Flu https://bit.ly/3482qaY
- Coleta remota de sangue por picada de dedo para teste de anticorpos SARS-CoV-2. https://meridian.allenpress.com/aplm/article/doi/10.5858/arpa.2020-0713-SA/449019/Remote-fingerstick-blood-collection-for-SARS-CoV-2 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Análise abrangente da dinâmica de anticorpos SARS-CoV-2 na Nova Zelândia. https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2020.12.10.20246751v1 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Subclasses e alotipos de IgG: da estrutura às funções efetoras. https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2014.00520/full (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- A coleta de sangue seco (DBS) podem contribuir para a realização de testes abrangentes de anticorpos SARS-CoV-2? https://onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1002/dta.2816 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Um nanoimunoensaio microfluídico de alto rendimento para detectar anticorpos anti-SARS-CoV-2 em soro ou amostras de sangue seco de volume ultrabaixo. https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2020.10.07.20208280v3.full.pdf (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- A proteína do nucleocapsídeo SARS-Coronavirus-2 medida no sangue usando um imunoensaio ultrassensível Simoa diferencia a infecção por COVID-19 com alta sensibilidade clínica. https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2020.08.14.20175356v2 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Aplicação de dispositivos de microamostragem de absorção volumétrica ao teste de anticorpos IgG Simoa® SARS-CoV-2. https://www.quanterix.com/whitepapers-appnotes/application-of-volumetric-absorptive-microsampling-devices-to-the-simoa-sars-cov-2-igg-antibody-test/ (Último acesso em 07 de janeiro de 2021 )
- Teste de sorologia do grupo LGC. https://www.lgcgroup.com/media/2331/lgc_dds_covid19_serology_assay_02_10_2020_update.pdf (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- CountOnMe ® , Informação para pacientes e familiares. https://www.emeesykidney.nhs.uk/resources-for-families/countonme (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Avaliação da concentração de tacrolimus e creatinina coletada usando dispositivos de microamostragem Mitra. https://journals.sagepub.com/doi/10.1177/0004563220948886 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Infecção por COVID-19 em Receptores de Transplante Renal: Incidência da Doença e Resultados Clínicos. https://jasn.asnjournals.org/content/31/10/2413 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Amostragem de sangue DIY para ensaios clínicos pediátricos – a perspectiva dos pacientes. https://www.appliedclinicaltrialsonline.com/view/diy-blood-sampling-pediatric-clinical-trials-patients-perspective (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Um estudo farmacocinético da suspensão oral de radiprodil em adultos saudáveis comparando a amostragem de sangue venoso convencional com duas técnicas de microamostragem. https://bpspubs.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/prp2.459 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Oferecendo opções aos pacientes: a abordagem em evolução da AstraZeneca para amostragem centrada no paciente.https://www.future-science.com/doi/abs/10.4155/bio-2020-0105 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)
- Novo método LC-MS/MS para a determinação de selumetinibe (AZD6244) em sangue total coletado com microamostragem absortiva volumétrica
https://www.future-science.com/doi/abs/10.4155/bio-2020-0062 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021) - Hidroxicloroquina como profilaxia pré-exposição para a doença de coronavírus 2019 (COVID-19) em profissionais de saúde: um estudo randomizado
https://academic.oup.com/cid/advance-article/doi/10.1093/cid/ciaa1571/5929230 (Último acesso em 07 de janeiro de 2021)